Skip to content

Hepatotoksyczność indukowana acetaminofenem u myszy zależy od Tlr9 i Nalp3 inflammasome ad 7

1 miesiąc ago

789 words

W wątrobie Tlr9 ulega ekspresji głównie na sinusoidalnych komórkach śródbłonka, a zatem są one głównymi kandydatami do badania populacji komórek (24). Pokazaliśmy, że LSEC można stymulować przez apoptotyczny DNA ssaka w sposób zależny od Tl9 w celu zwiększenia ekspresji pro (IL-1 (3. i pro-IL-18 i ta aktywacja kaspazy-1 występuje w LSECs po hepatotoksyczności APAP (Figura 3, C = F). Wiadomo jednak, że wątroba zawiera bardzo złożoną populację komórek niemiąższowych, w tym komórki Kupffera, komórki NK, komórki NKT, komórki dendrytyczne i komórki gwiaździste. Istnieje bardzo ograniczona informacja na temat reakcji tych populacji na aktywację Tlr9, chociaż niektóre z nich są znane z ekspresji Tlr9 (23, 36). Rola tych populacji w wykrywaniu DNA z komórek apoptotycznych nie została jeszcze ustalona. Istnieją jednak istotne dane wykazujące, że IL-1. a IL-18 stymuluje aktywację komórek niepłaskości wątroby. Biorąc pod uwagę model przedstawiony na Figurze 7, przewiduje się, że aktywacja komórek niepłciowych wątroby będzie zachodzić po wytworzeniu IL-1 (3. i IL-18 przez komórkę wykrywającą. Figura 7Produkcja dojrzałej IL-1. w hepatotoksyczności APAP. Uwolnienie dojrzałej IL-1. wymaga transkrypcji pro. IL-1. a następnie cięcie i wydzielanie przez aktywowaną kaspazę-1. W hepatotoksyczności APAP okazało się, że apoptotyczne DNA ssaków zwiększa transkrypcję proA IL-1. za pośrednictwem szlaku zależnego od Tlr9, wykazano, że kaspaza-1 jest aktywowana za pośrednictwem szlaku Nalp3 / ASC. Należy określić tożsamość przypuszczalnych molekuł związanych z niebezpieczeństwem odpowiedzialnych za aktywację inflamasomu Nalp3 w hepatotoksyczności APAP. W badaniu tym wykazano również, że kwas acetylosalicylowy hamuje odpowiedź zapalną zależną od Nalp3 inflammasom, przy niskiej dawce (4. 6 mg / kg) (Figura 5B). Wcześniej wykazano, że kwas acetylosalicylowy zmniejsza obrażenia wątroby, ale nie poprawia przeżycia z APAP u myszy i szczurów, gdy podaje się go w zakresie dawek toksycznych dla ludzi (200. 600 mg / kg) (37, 38). Wiadomo, że takie wysokie dawki hamują COX-2, a późniejsze wykazanie, że COX-2 chroni przed toksycznością APAP, może być przyczyną niezdolności aspiryny w tych dawkach do poprawy śmiertelności (29). Z powodu braku wpływu na śmiertelność i toksyczne dawki aspiryny, nie było żadnych klinicznych implikacji dla tych wcześniejszych ustaleń. Nasze odkrycia stanowią pierwszą demonstrację naszej wiedzy o hamowaniu szlaku za pośrednictwem inflamasomu i redukcji transkrypcji cytokin zapalnych za pomocą kwasu acetylosalicylowego (28). Ma to wartość, ponieważ znana zdolność aspiryny do hamowania COX-1 i COX-2 nie wyjaśnia jej działania przeciwzapalnego. Zgodnie z tym, hamowanie COX-1 i COX-2 i degranulacja płytek krwi nie chroni przed hepatotoksycznością APAP. Wymóg zapalenia za pośrednictwem Nalp3, w którym pośredniczy inflammasomalny stan zapalny w hepatotoksyczności indukowanej przez APAP, oraz zdolność aspiryny do hamowania tej ścieżki w stopniu zmniejszającym uszkodzenie wątroby i poprawiającym przeżycie mają znaczące implikacje kliniczne. Jeżeli wyniki te zostaną potwierdzone u ludzi, to współfinansowanie aspiryny za pomocą APAP może zmniejszyć hepatotoksyczność przed przedawkowaniem APAP. Ponadto inflammasom Nalp3 może odgrywać ważną rolę w innych postaciach jałowego zapalenia, takich jak niedokrwienne i niealkoholowe stłuszczeniowe zapalenie wątroby. Metody Zwierzęta. Myszy C57BL / 6 zakupiono od National Cancer Institute. Nalp3. / ., Ipaf. /. I ASC. /. myszy dostarczali A. Coyle, J. Bertin i E. Grant (Millennium Pharmaceuticals) (39. 41). Wszystkie myszy krzyżowano z powrotem 9 pokoleniami na tle C57BL / 6, z wyjątkiem Casp1. /. i Ipaf. /. myszy, które zostały skrzyżowane z pokryciem 5. 6 pokoleń. Il18. /. i Tlr9. /. Myszy zostały opisane wcześniej i były darem S. Akiry (Osaka University, Osaka, Japonia) (42, 43). IL-1. został zneutralizowany przy użyciu anty-IL-1. przeciwciało z klonu B122 (podarunek R. Schreibera, Washington University, St. Louis, Missouri, USA) w dawce 0,2 mg / mc iv dwa razy dziennie przez w sumie 48 godzin po podaniu APAP. Myszy kontrolne otrzymały kontrolne izotypowe chomicze przeciwciało chomika. W doświadczeniach dotyczących przeżycia zwierzęta uśmiercono, gdy stały się konające zgodnie z kryteriami braku odpowiedzi na bodźce lub braku odruchu prostującego. Protokoły dla zwierząt zostały zatwierdzone przez IACUC Uniwersytetu Yale. Hepatotoksyczność indukowana przez APA. Roztwór APAP (Sigma-Aldrich) przygotowano na świeżo dla każdego doświadczenia w PBS przy 20 mg / ml i ogrzewano w łaźni wodnej do 55 ° C w celu rozpuszczenia. APAP dawkowano w dawce 500 mg / kg i wstrzykiwano ip po 15 godzinach głodzenia. Zwierzęta uśmiercono przez wstrzyknięcie ketaminy / ksylazyny po 12 godzinach w celu zebrania surowicy, izolacji limfocytów wątroby lub pobrania tkanki wątrobowej do badania histologicznego lub obserwowano je co 4 godziny przez 72 godziny, aż do momentu, w którym stały się konające. Aspiryna, klopidogrel, SC-560
[hasła pokrewne: zielnik hodowcy, enrobioflox 10, czy można żyć bez trzustki ]
[więcej w: karma dla owczarka niemieckiego, zerwanie więzadła krzyżowego przedniego, testy osobowości psychologia ]