Skip to content

Hepatotoksyczność indukowana acetaminofenem u myszy zależy od Tlr9 i Nalp3 inflammasome ad 5

1 miesiąc ago

248 words

Jedną z wartości wykazujących nowe szlaki w procesie chorobowym jest to, że może to prowadzić do nowych terapii. W tym kontekście naszym celem było zidentyfikowanie bezpiecznego, przeciwzapalnego środka, który hamowałby szlak Nalp3 / ASC / kaspaza-1. Środek ten może mieć potencjał terapeutyczny w hepatotoksyczności indukowanej przez APAP i prawdopodobnie w innych rodzajach uszkodzenia wątroby. Aby przetestować potencjalne leki, wykorzystaliśmy ustalony model aktywacji inflamasomu Nalp3, w którym iniekcja ip kryształów MSU wywołuje neutrofilowe zapalenie otrzewnej (27). Najpierw potwierdziliśmy, że Nalp3 jest wymagany w tym modelu poprzez testowanie na myszach z niedoborem Nalp3. Zgodnie z oczekiwaniami, Nalp3. /. u myszy stwierdzono znacznie mniejszy naciek neutrofilowy po 3 godzinach w porównaniu z myszami Nalp3 + / + prowokowanymi kryształami MSU (Figura 5A). Następnie sprawdziliśmy, czy aspiryna w niskiej dawce (kwas acetylosalicylowy [ASA]), powszechnie dostępny, tani i bezpieczny lek może hamować tę drogę. Znaleźliśmy 8-krotne zmniejszenie wysięku neutrofili, gdy myszy otrzymywały początkowo niską dawkę kwasu acetylosalicylowego w wodzie do picia przez 3 dni przed indukcją zapalenia otrzewnej MSU (Figura 5B). Następnie zbadaliśmy, czy aspiryna w niskiej dawce ochroni przed uszkodzeniem wątroby wywołanym przez APAP. Okazało się, że podanie małej dawki aspiryny chroniło przed uszkodzeniem wątroby wywołanym APAP, co wykazano przez znacznie poprawioną przeżywalność i histologię (Figura 5, C = E). Gdy aspiryna była zgodna z APAP, nadal oferowała znaczną, choć zmniejszoną, ochronę (kontrola: 22%. 19% przeżycie, aspiryna przy 6 mg / kg: 43%. 11% przeżycie, P <0,04). Figura 5Aspiryna hamuje szlak Nalp3 i zmniejsza uszkodzenie wątroby wywołane APAP. (A) Nalp3 + / + lub Nalp3. /. myszom wstrzykiwano kryształy MSU ip (3 mg / mysz). Po 3 godzinach przeprowadzono płukanie otrzewnej i zmierzono liczbowo liczbę granulocytów obojętnochłonnych GR-1 (3 (* P <0,0001). (B) Myszy typu dzikiego były leczone z lub bez aspiryny (60 mg / l) w wodzie do picia przez 3 dni, a następnie wstrzykiwano im kryształy MSU lub PBS. Po 3 godzinach przeprowadzono płukanie otrzewnej i zmierzono liczbowo liczbę granulocytów obojętnochłonnych Gr-1 (3 (* P <0,0001). (C) Analiza przeżycia myszy leczonych i bez aspiryny (60 mg / l) w wodzie do picia przez 3 dni, a następnie wstrzyknięto ip APAP (500 mg / kg) (kontrolna woda pitna: n = 13, woda pitna aspiryny: n = 17, P <0,02). (D) Sekcje tkanki wątrobowej wybarwione H & E (oryginalne powiększenie, x 20) od myszy typu dzikiego 12 godzin po wstrzyknięciu ip APAP lub PBS. Myszom podawano aspirynę lub regularną wodę pitną przez 3 dni przed wstrzyknięciem APAP. U myszy otrzymujących aspirynę dochodzi do znacznego zmniejszenia urazu wątroby i krwotoku wywołanego przez APAP. (E) Poziomy ALT w surowicy od myszy typu dzikiego 12 godzin po wstrzyknięciu APAP zi przed leczeniem aspiryną. Grupa leczona aspiryną miała znacząco niższe poziomy ALT w surowicy (P <0,04). Paski błędów wskazują SD. Aspiryna ma wiele dobrze scharakteryzowanych efektów zależnych od dawki. Przy niskiej dawce (1. 6 mg / kg / d) aspiryna hamuje COX-1 i degranulację płytek krwi, a ostatnio stwierdzono, że reguluje transkrypcję genu (28). Przy wyższych dawkach hamuje się COX-2 i NF-kB. Dawka, której użyliśmy (4. 6 mg / kg) była niższa niż wymagana dla inhibicji COX-2 i NF-kB. Wiadomo również, że hamowanie COX-2 raczej zwiększa niż zmniejsza hepatotoksyczność indukowaną przez APAP i dlatego jest mało prawdopodobne, aby było mechanizmem ochronnego działania aspiryny (29). W związku z tym przetestowaliśmy, czy działanie ochronne aspiryny może być skutkiem hamowania COX-1 lub degranulacji płytek krwi przez podawanie klopidogrelu lub inhibitora SCX-1 COX-1. Hamowanie degranulacji płytek krwi lub COX-1 przed ekspozycją APAP nie chroniło myszy przed toksycznością APAP (Figura 6, A i B), co sugeruje, że nowy mechanizm odpowiadał ochronnym skutkom niskiej dawki aspiryny. Figura 6 Spirynę reguluje w dół pro- | IL-1. i pro-transkrypty IL-18. (A) Przeżycie po wstrzyknięciu ip APAP zi bez klopidogrelu przez zgłębnik (30 mg / kg co 24 godziny) (zgłębnik PBS: n = 15, zgłębnik klopidogrelu: n = 15, P = 0,31). Klopidogrel lub PBS podawano w żołądku co 24 godziny, rozpoczynając 48 godzin przed i kończąc 24 godziny po wstrzyknięciu APAP. (B) Przeżycie po wstrzyknięciu ip APAP zi bez inhibitora COX-1 SC-560. SC-560 (5 mg / kg) lub kontrolne PBS zgłębiano dwa razy dziennie, rozpoczynając 60 godzin przed i kończąc 48 godzin po wstrzyknięciu APAP (zgłębnik PBS: n = 10, sonda SC-560: n = 10, P = 0,97). (C7F) Q-PCR dla proA IL-1 p, proA IL-18, TNF-a i IFN-y z całych wątrób myszy traktowanych jak opisano powyżej. Pokazano wyniki z reprezentatywnego eksperymentu 4; każda grupa reprezentuje 3 myszy (* P <0,03, ** P <0,005) [hasła pokrewne: gołębniki świata, zaburzenia afektywne dwubiegunowe, zielnik hodowcy ] [podobne: szpital okulistyczny poznań, ziarno prawdy online cda, olej kokosowy wybielanie zębów ]