Skip to content

Dynamiczna dystrybucja kalpainy specyficznej dla mięśni u myszy odgrywa kluczową rolę w adaptacji stresu fizycznego i jest upośledzona w dystrofii mięśniowej ad

1 miesiąc ago

117 words

Powstałe myszy p94KI były płodne, z normalną długością życia. Jednak mięśnie szkieletowe (piszczelowe przednie [TA] i soleus) myszy p94KI wykazywały typowe objawy MD, takie jak rozszczepione miofibry i jądra zlokalizowane centralnie, a patologia ta była zaostrzona wraz z wiekiem (Figura 1, A (J). Udział centralnie zarodkowanych miowłókien (CNM) zarówno w TA, jak i jedynym psie myszy p94KI był znacząco wyższy niż u myszy WT (Figura 1, K i L). Średnie powierzchnie przekroju poprzecznego muflera (CSA) w mięśniach płaszczkowatych myszy WT i p94KI w wieku ponad 90 tygodni wynosiły odpowiednio 1,542 .m2 i 1342 .m2, które były znacząco różne (P <0,01) (Figura 1M) . Poziom CK w surowicy, inny typowy marker dla MD wskazujący na uszkodzenie błony mięśniowej, nie różnił się istotnie pomiędzy myszami p94KI i WT, wykazując, że u myszy p94KI nie wystąpiło znaczące uszkodzenie błony (Figura 1N). Ultrastruktura mysiego mięśnia p94KI była również normalna i nie różniła się znacząco od myszy WT (Figura 1, O i P). Zatem myszy p94KI miały stopniowo postępujący fenotyp MD, który pogarszał się wraz z wiekiem bez poważnych zakłóceń sarkometrem. Przeciwnie, zarówno pacjenci z mutacjami typu CAPN3-zerowego, jak i myszy p94KO wykazują bardziej ostry fenotyp MD (9, 10, 13, 14). Ta różnica w nasileniu choroby między tymi przypadkami MD i obserwowanymi u myszy p94KI sugeruje, że p94 ma funkcje inne niż jego rola w proteolizie, które są zaangażowane w patologię MD. Figura M fenotypy u myszy p94KI. (A | J) Sekcje mięśniowe TA barwione H & E z myszy WT (A, C, E, G i I) i p94KI (B, D, F, H i J) w podanym wieku. p94KI wykazywał typowe fenotypy dystroficzne, takie jak inwazja komórek (kropkowane kółka), jądra centralne (czarne groty strzałek) i rozdwajanie miofibrów (białe groty strzałek). Pręty skali: 100 .m. (K i L) Zwiększony CNM podczas starzenia u myszy p94KI. Liczba CNM w TA (K) i soleus (L) została porównana z liczbą całkowitych miofibrów. (M) Rozkład częstości CSA miofibru w podeszwie myszy w wieku powyżej 90 tygodni. W każdej sekcji odnaleziono 3 302 profile włókien od 3 myszy każdego rodzaju. Średni CSAr myofiberu wynosił 1542. M2 u myszy WT i 1342. M2 u myszy p94KI. Rozmiar włókien u myszy p94KI był znacznie mniejszy niż u myszy WT (P <0,01). Białe paski, WT; czarne paski, p94KI. (N) Średni poziom CK w surowicy (IU / l) u myszy p94KI był wyższy niż w WT, ale ta różnica nie była statystycznie istotna. * P <0,05 względem WT. (O i P) Analiza ultrastrukturalna wykazała typowy prążkowany wzór z prawidłowo zmontowanymi sarkomerów u 91-tygodniowej myszy p94KI (P) bez wyraźnej różnicy w stosunku do 26-tygodniowej myszy WT (O). Paski skali: .m. Znieczulenie mięśni wywołane wysiłkiem fizycznym u myszy p94KI. U ludzi wykazano, że ćwiczenia ekscentryczne powodują autolizę p94 (20). Obserwacja ta sugeruje, że aktywność proteazy p94 odgrywa rolę w adaptacyjnej odpowiedzi mięśni na ćwiczenia. W związku z tym zbadaliśmy, czy aktywność fizyczna wpływa na patogenezę MD u myszy p94KI. Poddaliśmy myszy p94KI i WT bieżni zjazdowej i oceniliśmy biochemiczne i patologiczne zmiany w ich mięśniach szkieletowych. Analiza immunoblotów wykazała, że p94 poddano proteolizie podczas wysiłku (Figura 2, A i B) i że jego rozkład przesunął się z osadu (Ppt; myofibril) do frakcji supernatantu (Sup; cytosol) w WT, ale nie u myszy p94KI podczas wysiłku (Suplementy Rysunek 2). Zwyrodnienie miowłókien wywołane rozerwaniem błony, jak ujawniono przez włączenie niebieskiego barwnika Evansa (EBD), było wyraźnie obserwowane u wyćwiczonych myszy p94KI (p94KI-ex), ale było ledwo wykrywalne u myszy ćwiczonych WT (WT-ex) ( Figura 2, C = N). Miofibry zawierające EBD zaobserwowano wśród wszystkich klas CSAr w mięśniu p94KI-ex, co wskazuje, że rozerwanie błony nie zaostrzyło się w poszczególnych klasach włókien mięśniowych (Suplementowa Figura 3). Zgodnie z tymi ustaleniami poziom CK w surowicy u myszy p94KI-ex był znacząco wyższy niż u myszy W94-ex lub nietraktowanych p94KI (Figura 2O). Udział CNM był również znacząco zwiększony u myszy p94KI, ale nie myszy WT 10 dni po ćwiczeniach (Figura 2, P i Q). Wyniki te jasno wskazują, że aktywność proteazy p94 jest wymagana do ochrony mięśniówki przed degeneracją w warunkach stresu wywołanego wysiłkiem fizycznym. Rycina 2 Znieczulenie mięśniowe wywołane wysiłkiem fizycznym w p94KI. (A i B) Immunodetekcja p94 i jej fragmentów (odpowiednio czarne i białe groty strzałek) u myszy WT, WT-ex, p94KI i p94KI-ex [przypisy: zielnik hodowcy, pzhgp nowa sól, zaburzenia afektywne dwubiegunowe ] [więcej w: ziarno prawdy online cda, olej kokosowy wybielanie zębów, dieta po operacji ginekologicznej ]