Skip to content

Angiotensynowe receptory AT1A na komórkach wyrażających receptory leptyny kontrolują spoczynkowy metabolizm czesc 4

1 miesiąc ago

47 words

(D. F) Masa ciała (D), masa tłuszczowa (E) i skorygowany względem ANCOVA RMR (F) myszy C57BL / 6 i db / db traktowanych solą DOCA (n = 7 kontroli pozornej; n = 9 kontrola Sól DOCA; n = 6 db / db pozorna; n = 12 db / db DOCA-sól). Dane reprezentują średnią. SEM. * P <0,05, według wielokrotnej procedury porównawczej Tukeya. Jednokierunkowe oddziaływanie między AT1A i LEPR w sterowaniu RMR. Aby wyjaśnić kierunkowość centralnego oddziaływania między leptyną i ANG II w kontroli RMR, zbadaliśmy następnie efekty stymulacji RAS mózgu u zwierząt z niedoborem LEPR (myszy db / db). Na początku, myszy db / db miały znaczące zwiększenie masy ciała i tkanki tłuszczowej, jak wcześniej podano (Figura 4, D i E). Po stymulacji RMR solą DOCA, zarówno myszy kontrolne, jak i db / db odpowiedziały znaczącymi wzrostami RMR (Figura 4F). Zgodnie ze wzrostem RMR, myszy db / db traktowane solą DOCA wykazywały znaczące zmniejszenie masy tłuszczowej (Figura 4E). To, w połączeniu z powyższymi ustaleniami, prowadzi do wniosku, że efekty metaboliczne leptyny wymagają funkcjonalnych receptorów AT1A na komórkach zawierających LEPR, podczas gdy efekty RMR mózgu ANG II nie wymagają funkcjonalnej sygnalizacji leptyny. Wnioskujemy, że istnieje pewna kierunkowość do centralnego oddziaływania między leptyną i ANG II w kontroli RMR. Ponadto, odpowiedzi BP na sól DOCA są zachowane u myszy db / db (20), co dodatkowo wspiera model rozbieżnej kontroli BP i RMR przez mózgowy RAS, obejmujący receptory AT1A w odrębnych szlakach nerwowych. Zmniejszono AgRP i normalne odpowiedzi POMC na HFD w ARC u myszy AT1ALepR-KO. Aby ustalić, czy AT1A jest zlokalizowane w określonym podzbiorze komórek wyrażających LEPR ARC, najpierw zbadaliśmy ekspresję genów Pomc i Agrp w tym regionie mózgu u myszy kontrolnych AT1ALepR-KO i myszy z miotami w warunkach karmienia chow- i HFD. Pięć tygodni karmienia HFD spowodowało znaczący wzrost ekspresji POMC w podwzgórzu myszy AT1ALepR-KO i myszy kontrolnych z miotu (Figura 5A). W przeciwieństwie do tego, karmienie HFD powodowało znaczącą supresję podwzgórzowej ekspresji mRNA Agrp u myszy kontrolnych, ale nie zaobserwowano znaczącej supresji u myszy AT1ALepR-KO (Figura 5B). Dane te potwierdzają koncepcję, że utrata AT1A w komórkach z ekspresją LEPR ma specyficzny wpływ na modulowanie funkcji AgRP, ale prawdopodobnie nie na POMC, neurony podwzgórza. Figura 5AT1A w neuronach AgRP. (A i B) Ekspresja mRNA podwzgórza Pomc (A) i Agrp (B) u myszy kontrolnych i AT1ALepR-KO na diecie karmy lub po 5 tygodniach 45% HFD (n = 12 myszy kontrolnych karmionych karmą, n = 4 Myszy kontrolne karmione HFD, n = 4 karmione karmią myszy AT1ALepR-KO, n = 6 myszy AT1ALepR-KO karmionych HFD). (C) Reprezentatywne fotomikrografie receptora AT1A i ACTH (POMC) lub AgRP w ARC karmionych karmą zwierząt Lepr-Cre ROSA-stopflox-tdTomato NZ44 (pręty skali: 75 um). (D) FISH dla transkryptów mRNA AT1a, Pomc i Agrp w ARC myszy WT C57BL / 6J (paski skali: 25 .m). (E) Skorygowany względem ANOVA RMR na linii podstawowej i w odpowiedzi na podanie ip [Nle4D Phe7] -A MSH (4,5 ug / g) u myszy kontrolnych i AT1ALepR-KO (n = 3 wyjściowa kontrola, n = 3 kontrola. Myszy traktowane MSH, n = 7 karmionych karmą myszy AT1ALepR-KO, n = 7a traktowanych MSH myszy AT1ALepR-KO). * P <0,05, według wielokrotnej procedury porównawczej Tukeya. Zakłócenie AT1A w komórkach z ekspresją AgRP specyficznie przerywa kontrolę RMR. Następnie badaliśmy kolokalizację receptorów AT1A za pomocą neuronów POMC i AgRP. Aby określić, czy neurony POMC wyrażają receptor AT1A, odbarwialiśmy tkankę mózgową myszy NZ44 pod kątem adrenokortykotropiny (ACTH), produktu rozszczepienia genu Pomc i markera dla neuronów POMC. Aby określić, czy neurony AgRP wyrażają receptor AT1A, myszy eksprymujące tdTomato pod kontrolą promotora Agrp (myszy Agrp-Cre ROSA-stopflox-tdTomato) hodowano z myszami NZ44. Podczas gdy neurony POMC nie wydają się wyrażać receptora AT1A, zaobserwowaliśmy znaczącą lokalizację receptora AT1A na neuronach AgRP (Figura 5C). Dane te są zgodne z danymi z sekwencjonowania RNA demonstrującymi ekspresję receptorów AT1A na AgRP, ale nie na POMC, neurony izolowane za pomocą mikrodyssekcji laserowej (21). W celu uzupełnienia tej opartej na reporterach metody wykorzystano również FISH (RNAscope) do zbadania kolokalizacji transkryptów mRNA endogennych AT1a, Pomc i Agrp w ARC myszy WT C57BL / 6J. Zgodnie z oczekiwaniami, wykryliśmy transkrypty AT1a w komórkach również wyrażających AgRP, ale nie w komórkach wyrażających POMC (Figura 5D i Suplemental Data, materiał uzupełniający dostępny online z tym artykułem; https://doi.org/10.1172/JCI88641DS1). -Mananocyt. działanie stymulujące hormony na neurony drugiego rzędu jest tłumione u myszy AT1ALepR-KO [podobne: enrobioflox 10, szpital okulistyczny poznań, apteka hygea zielona góra ] [patrz też: zielnik hodowcy, karmienie gołębi pocztowych, lotowanie gołębiami młodymi ]